尊龙凯时专注于提供细胞体外基因敲除解决方案，并提供针对细胞基因敲除的定制服务。目前，我们已经推出了多个细分的敲除服务，欢迎广大客户咨询尊龙凯时团队，获取技术路线及成功案例资料。

定制服务与Q&A更新

尊龙凯时提供真核细胞体外基因敲除的定制服务。在此基础上，尊龙凯时团队将定期更新常见问题解答(Q&A)，以更好地为客户服务。以下是Q&A【2503版】的部分问题：

基因敲除服务常见问题

• 如何验证基因敲除是否成功？
• 精准敲除与模糊敲除有什么区别？

精准敲除与模糊敲除的区别

精准敲除是通过同源重组（HDR）机制，在目标基因中引入精确的修饰，如特定片段的删除、点突变或插入，从而完全或部分失活基因功能。相较于一般的基因敲除，精准敲除的实验策略具有独特性。尊龙凯时团队为客户提供针对靶基因指定区域的精准敲除、敲入及突变等服务。

模糊敲除则是通过非同源末端连接（NHEJ）机制，在目标基因的特定区域随机引入插入或缺失突变，导致基因编码框移位或提前终止密码子，进而破坏基因功能。

其他技术问题

• CRISPR/Cas9方法的最大可敲除片段范围？
• 如何提高原代细胞的编辑效率？
• 如何分析基因敲除后的表型变化？

CRISPR/Cas9 RNP基因编辑法将多条针对靶基因的single-guide RNA（sgRNA）与Cas9蛋白在体外混合形成核糖核蛋白复合物（RNP），通过电转化或脂质体转染的方式，将RNP“瞬时”递送至细胞内，从而实现高效稳定的基因编辑。相较于传统的慢病毒或质粒方法，RNP技术能够在细胞内较短时间内完成基因组编辑，并且不引入外源序列，极大程度上保持细胞表型。

由于RNP在72小时内完成基因组编辑后便会被细胞降解，因此此方法降低了脱靶效应的风险，并有效避免了由于病毒基因组的随机整合而影响后续功能性实验的情况。尊龙凯时的CRISPR/Cas9 RNP法正在逐渐取代传统的基因敲除细胞系构建方式，为生物医疗领域的发展带来新的机遇。